Pustaka Ilmiah Universitas Padjadjaran

Abstrak

Identifikasi Pola Pewarisan Maternal Mutasi G9053A DNA Mitokondria Pada Pasien Diabetes Mellitus Tipe 2 Dan Katarak

Latar Belakang Dari hasil penelitian sebelunmya ditemukan mutasi pada DNAmitokondria (mtDNA) pada pasien diabetes melitus tipe 2 dan katarak, yakni mutasi G9053A. Mutasi ini memiliki indikasi diwariskan secara maternal. Namun perlu dibuktikan lebih lanjut dengan analisis mutasi tersebut pada generasi selanjutnya. Tujuan Oleh karena itu, tujuan penelitian ini untuk mengidentiflkasi mutasi tersebut pada pasien diabetes mellitus tipe 2 dan kataraksampaitiga generasi. Metode menggunakan metode PCR-RFLP dan direct sequencing. Hasil yang diperoleh dikonfirmasi lebih lanjut menggunakan analisis pewarisan berdasarkan garis keturunan ibu pada tiga generasi subjek yang mengalami mutasi mtDNA tersebut. Metodologi yang digunakan dalam penelitian ini adalah lisis sampel dari jaringan sel epitel mukosa mulut sebagai templat mtDNA, amplifikasi fragmen E (1992 pb) dengan primer Efoi/Erevj pemumian produk PGR dengan presipitasi etanol lalu dilakukan restriksi dengan enzim Hin PI, kemudian amplikon yangdiperoleh dilakukan karakterisasi gel agarosa 2%dan analisis pola restriksi serta dibaca urutan nukleotidanya dengan direct sequencing. Hasil dari metode PCR-RFLP menunjukkan hasil pada tiga individu segaris ibu memiliki pola pemotongan yang sama dan mengindikasikan bahwa mutasi G9053A diturunkan secara maternal. Hasil tersebut diperkuat oleh hasil direct sequencing yang diolah oleh software DNAstar, yaitu Megalign dan Seqman, menunjukkan adanya mutasi homoplasmi G9053A pada generasi pertama (El) dan generasi ketiga (Am) yang menunjukan pola pewarisan dan secaraotomatis generasi kedua(Li) pun mewarisi mutasi ini. Dari hasil tersebut, disimpulkan bahwa mutasi G9053A diwariskan secara maternal pada tiga generasi pasien diabetes mellitus tipe 2 dan katarak dan hal ini mengindikasikan bahwa mutasi G9053A merupakan mutasi germinal bukan mutasi somatis.