Abstrak 
Konstruksi Dan Optmasi Gen Pretrombin-2 Manusia Dalam Escherichia coli Untuk Produksi Trombin Sebagai Komponen Lem Fibrin
Saronom Silaban, Iman Permana Maksum, Shabarni Gaffar, Sutarya Enus, Khomaini Hasan, Toto Subroto, Soetijoso Soemitro
Universitas Padjadjaran, Prosiding Seminar Nasional MIPA 2014 FMIPA Universitas Padjadjaran Peran Ilmu Dasar Dalam Pembangunan Berwawasan Lingkungan, ISSN : 9772442242DD3
Bahasa Indonesia, Bahasa Inggris
Universitas Padjadjaran, Prosiding Seminar Nasional MIPA 2014 FMIPA Universitas Padjadjaran Peran Ilmu Dasar Dalam Pembangunan Berwawasan Lingkungan, ISSN : 9772442242DD3
Escherichia coli, kodon preferensi, lem fibrin, pretrombin-2, trombin
Lem fibrin merupakan biomaterial perekat yang menggunakan trombin, fibrinogen dan faktor XIII sebagai bahan utama. Bahan ini dapat diterapkan untuk mengganti teknik jahitan pasca operasi. Dalam studi ini, kami mendesain dan mengkonstruksi gen prethrombin-2 (pt2) manusia, yang merupakan prekursor trombin. Gen pt2 difusikan dengan suatu tag pada posisi N terminalnya, yang mengandung urutan pengode intein diikuti oleh domain pengikat kitin, yang bermanfaat untuk proses pemurnian. Proses pemotongan pt2 dari tag diinduksi melalui perubahan pH/ suhu. Kodon pt2 dirancang sesuai dengan kodon preferensi Escherichia coli. Gen pt2 dirancang menggunakan software OPTIMIZER dengan penambahan dua sisi restriksi pada ujung 5′ dan 3′ nya, yaitu berturut-turut BamHI dan XhoI, selanjutnya dikloning menggunakan vektor pMAT dalam E. coli. Selanjutnya fragmen pt2 diligasi ke vektor ekspresi pTWIN1 untuk E.coli. Hasil karakterisasi gen pt2 dalam pTWIN1 menggunakan metoda sequensing DNA memperlihatkan bahwa gen pt2 hasil rancangan sudah berhasil dikloning. Dengan demikian, gen pt2 hasil kloning ini dapat digunakan sebagai bahan awal untuk ekspresi PT2 dalam inang E. coli.