Pustaka Ilmiah Universitas Padjadjaran

Abstrak

Pemanfaatan Senyawa Aktif Dari Herba Sasaladaan (Peperomia Pellucida (L.) H.B.K) Sebagai Obat Antidiabetes ( Laporan Akhir Penelitian Hibah Bersaing )

Menurut survey yang dilakukan oleh organisasi kesehatan dunia WHO Indonesia menempati urutan ke-4 terbesar dalam jtnnlah penderita diabetes melitus dengan prevalensi 8,6% dari total penduduk, setelah India, China dan Amerika Serikat. (Depkes, 2005; Hiswani, 2007). Pada umumnya penyakit diabetes melitus dapat diobati dengan pemberian insulin dan antidiabetika oral, namun sebagian besar obat antidiabetika tersebut menimbulkan efek samping yang merugikan dan umumnya membutuhkan biaya yang tinggi. Salah satu solusi pengobatan diabetes adalah dengan memanfaatkan bahan alam (Djomeni et al., 2006). Salah satu tanaman yang prospektif d&embangkan sebagai obat antidiabetes alam adalah herba sasaladaan (Peperomia pellucida (L) H.B.K.). Telah dilakukan penelitian pendahuluan mengenai aktivitas antidiabetes ekstrak etanol herba P. pellucida (L) H.B.K. dengan dosis 250 mg/kg BB, 500 mg/kg BB, dan 1000 mg/kg BB menggunakan metode uji toleransi glukosa dan penurtman kadar glukosa darah paling balk ditunjukkan oleh ekstrak herba P. pellucida (L.) H.B.K. dosis 1000 mg/kg BB (Tediyanto, 2003). Penelitian terhadap fraksi n-heksana, fraksi ciil asetat, dan fraksi air herba P. pellucida (L) H.B.K. juga telah dilakukan dengan dosis 500 dan 1000 mg/kg BB dan hasil pengujian menunjukkan bahwa fraksi etd asetat memberikan penunman kadar glukosa paling kuat dibandingkan fraksi n-heksana dan fraksi air (Amrullah, 2003). Telah dilakukan pula penelitian penelusuran senyawa aktif antidiabetes dari fraksi etil asetat herba P. pellusida menggunakan metode uji toleransi glukosa. Senyawa aktif kemudian dikarakterisasi menggunakan instnimen untuk mengetahui identitas dari senyawa aktifnya Dari hasil penelitian diperoleh dua isolat yang memihki aktivitas. antidiabetes yaitu isolat PP-IIB1 dan dengan Rf 0,35 dan 0,23. Hasil uji aktivitas isolat PP-IIB1 dan PP-IIB2 dengan masing-masing dosis 100 mg/kg BB menunjukkan aktivitas antidiabetes pada mencit yang diinduksi aloksan. Penunman kadar glukosa darah masing-masing isolat adalah 42,28% dan 37,10%, isolate merupakan isolat yang paling balk sebagai antidiabetes, Hasil karakerisasi isolat PP-11B2 dengan data spektrum ultraviolet (UV), spektrum inframerah (IM), spektrum macsa, 111-RMI, dan “C-RM1, disimpulkan bahwa senyawa isolat adalah asam oleat. Penelitian pada tahun kedua, adalah membuat suatu produk farmasi bentuk tablet dari herba sasaladaan Pepemmia pellucida yang telah terbukti memi ki aktvitas yang signifikan terhadap antidiabetes melalui uji Tahapan yang dilakukan dalam penelitian tahap kedua ini meliputi tahapan ekstraksi, penetapan kadar air ekstrak, orientasi dosis sediaan tablet, formulasi tablet, evaluasi sediaan tablet dan uji toksisitas herba sasaladaan untuk mengetahui batas keamanan dosis ekstrak yang dapat digunakan. Metode ekstraksi yang digunakan adalah metode maserasi. Maserasi merupakan metode ekstraksi dingin yaitu proses perendaman sampel dengan pelarut organik pada temperatur niangan dalam suatu wadah yang tertutup. Hasil maserasi 800,05 gram simplisia herba sasaladaan menggunakan pelarut etanol 70% diperoleh 135,16 gram ekstrak kental. Dan maserasi tersebut diperoleh rendemen sebesar 16,89%. Ekstrak kental yang diliasilkan berwama hijau tea kecoklatan dengan bau khas sasaladaan dan berasa pahit. Penetapan kadar air ekstrak dilakukan untuk mengetahui kandungan air yang masih terdapat dalam ekstrak. Kandungan air dalam ekstrak hares memenuhi standar agar ekstrak terhindar dari cemaran nulroba karena air merupakan media yang balk untuk pertumbuhan milroba. Dan hash pengujian kadar air diperoleh hash kadar air ekstrak sasaladaan adalah 8.33%, sehingga ekstrak yang digunakan telah memenuhi persyaratan kadar air ekstrak yang ditetapkan oleh Badan POM yaitu kurang dari 10%. Orientasi dosis untuk menetapkan dosis tablet dilakukan dengan pengujian aktivitas ekstrak etanol herba sasaladaan dengan kontrol positif glibenklamid 0,45 mg/kg bb. Kelompok uji dibenlan suspensi ekstrak dengan dua variasi dosis : 125 mg/kg BB dan 250 mg/kgBB dalam PGA 2% secara oral. Dan hash analisis statist* diletahui bahwa dengan taraf signifikan 95% (a ),05), kelompok uji dosis I (125 mg/kg BB) memilili perbedaan signifikan dengan kontrol negatiJ artinya dosis 125 mg/kg BB terbukti mempunyai pengaruh terhadap penunman kadar glukosa darah tikus dibandingkan dengan kontrol negatif. Formulasi tablet dilakukan untuk mendapatkan tablet yang dibuat dengan metode kempa langsung, diperoleh empat formula dengan variasi AVICEL® PH102 sebagai pengikat tablet. Untuk mengetahui sifat zat yang akan dilempa maka dilakukan evaluasi massa kempa. Evaluasi massa kempa ini meliputi pemenksaan kadar air, kecepatan alir dan sudut istirahat, serta kerapatan serbuk (kerapatan nyata, kerapatan mampat serta kompresibilitas). Berdasarkan basil evalnasi kecepatan alir menunjukkan massa kempa tiap formula dapat mengalir dengan sangat balk karena memc7iki daya alir iebih besar dari 10 g/dtk, sehingga dapat dikatakan setiap formula tablet memiliki sifat aliran yang sangat back. Kecuali formula ketiga memiliki daya alir 8,96 g/dtk yang termasuk daya alir yang baik. Pengukuran sudut istirahat dilakukan untuk mengetahui sifat adhesi attu kohesi partikel yang akan mempengaruhi sifat aliran dari massa cetak tablet inti yang disebabkan oleh adanya gesekan antara parttlel-parttlel serbuk. Dari tabel diatas dapat dihliat bahwa setiap formula tablet tersebut mempimyai sudut istirahat < 25° yang berarti serbuk sangat mudah mengalir, karena serbuk dengan sudut istirahat < 25° menunjukan sifat aliran yang sangat Pengujian kerapatan nyata dan kerapatan mampat digunakan untuk menunjukkan kompresibilitas dari massa kempa tablet Dan hash perhitungan kompresibilitas menunjukkan jenis aliran dari massa kempa sangat bails, jika dilibat dari tabel Indeks Konsolidasi Cans massa kempa memibli sifat aliran dan kompresibilitas yang cukup memenuhi persyaratan yaitu diantara 18-23 %. Setelah proses pencetakan, tablet yang dihasilkan dilakukan beberapa evaluasi sesuai dengan persyaratan Farmakope Indonesia. Evaluasi tablet meliputi keseragaman bobot, keseragaman ukuran, keseragaman kekerasan, kerapuhan (friabilitas), dan waktu hancur. Keseragaman bobot tablet telah memenuhi persyaratan pada Farmakope Indonesia 1979 yaitu untuk tablet yang bobot rata-ratanya lebth dari 300 mg tidak ada tablet yang bobotnya menyimpang lebth dari lima persen dan tidak ada sate pun tablet yang bobotnya menyimpang lebth dari sepuluh persen bobot rata-rata tablet yang direncanakan. Rentang bobot tablet formula I 654,0-673,9 mg, formula II 651,4-673,6 mg, formula Ill 630,8-672,0 mg, dan formula IV 666,0-680,6 mg. Dari hash pengukuran diameter dan tebal terhadap 20 tablet untuk ketiga formula tablet menunjukkan hash pengukuran yang hampir seragam. Hash evaluasi keseragaman ukuran tablet untuk pengukuran diameter adalah 13,16 mm untuk formula I; 13,17 untuk formula II; 13,16 untuk formula III; dan 13,13 untuk formula IV. Sedangkan untuk pengukuran tebal tablet adalah 3,91 mm untuk formula I; 3,87 untuk formula II; 3,85 untuk formula III; dan 3,89 untuk formula IV Hasil evaluasi kekerasan tablet menunjukkan nilai sebagai berikut : formula I 65,4 N, formula II 68,17 N, formula III 72,84, dan formula IV 93,55. Dimana uji kekerasan tablet dilakukan untuk mengukur kekompakan tekanan yaitu besamya tahanan sebuah tablet terhadap gays yang bekerja pada saat tablet pecah. Serta tablet hams cukup keras untuk tahan pecah waktu penanganan atau pembuatan, pengemasan dan transportasi. Friabilitas tablet dapat dipengamhi oleh kandungan air dart granul dan produk akhir. Granul yang sangat kering dan hanya mengandung sedikit sekali persentase kelembaban, serinecali menan leblh banyak tablet yang renyah dibandingkan .dengan granul yang memiliki kadar air 2-4%. Friabilitas (kerapuhan) tablet yang dibuat dalam penelitian ini telah memenuhi persyaratan USP. Karena, tidak satupun dari formula tablet yang memiliki kehilangan bobot rata-rata leblh dart 0,8%. Hasil evaluasi rata-rata waktu hancur yang dffiasilkan oleh setiap formula tablet memenuhi persyaratan yaitu dibawah 15 merit. Waktu hancur tablet adalah waktu yang diperlukan untuk hancurnya tablet dalam waktu yang sesuai sehingga tidak ada bagian yang tertinggal diatas kasa. Dilakukan pada media cair dengan suhu 37° ± 2°C. Menurut Farmakope Indonesia, waktu yang diperlukan untuk hancurnya tablet tidak bersalut pada medium yang sesuai kecuali dinyatakan lain tidak leblh dart 15 merit. Hasil dart uji kualitatif terhadap ekstrak dan tablet menunjukkan bahwa senyawa yang terdapat pada ekstrak masffi teridenfifikasi dalam tablet formula I, formula II, formula III dan formula IV. Analisis dilakukan dengan cara Kromatografi Lapis Tipis (KLT). Dart hasil analisis terlihat bahwa tidak terdapat perbedaan antara pola bercak esktrak dengan pola bercak tablet formula I, II, III dan IV. Dengan kata lain proses formnlasi tidak mempengaruhi komponen kimia yang terdapat dalam ekstrak herba sasaladaan. Pengujian toksisitas akut dilakukan melalui pengamatan mortalitas mencit selama 14 hart, pengamatan berat badan mencit selama 14 hart, dan pengamatan perilaku mencit selama 24 jam sebagai akibat dart pemberian ekstrak etanol herba sasaladaan (Peperomia pellucida (L.) H.B.K..). Berdasarkan data pengamatan yang diperoleh dapat ditentukan harga LD50 ekstrak etanol herba sasaladaan pada mencit Pada pengujian diketahui bahwa dosis yang menyebabkan kematian sebanyak 50% pada mencit jantan adalah 7,5 g/kgBB yang sebanding dengan 5,25g/kgBB tikus. Berdasarkan kriteria toksisitas yang digolongkan oleh Hodge dan Sterner dapat disimplican bahwa ekstrak etanol herba sasaladaan praktis tidak tokslk karena LD50 berada pada dosis antara 5-15 g/kgBB tikus. According to a survey conducted by the world health organization WHO Indonesia ranks 4th largest in the number ofpeople with diabetes mellitus with a prevalence of 8.6% of the total population, after India, China and the United States (Depkes,2005). In general, diabetes mellitus can be treated with insulin and oral antidiabetika, but most of these antidiabetika drugs cause adverse side effects and generally require a higher cost. One solution is to utilize the diabetes treatment of natural materials (Djomeni et al., 2006).One of the prospective plant was developed as a natural antidiabetic drugs is herb sasaladaan (Peperomia pellucida (L) IIBK). Have done preliminary research on antidiabetic activity of ethanol extract of P. herba pellucida (L) HJ3.K. with a dose of 250 mg / kg, 500 mg / kg, and 1000 mg / kg using the method of glucose tolerance test and decreased blood glucose levels are best demonstrated by the extracts of herbs P. pellucida (L.) H.B.K. dose of 1000 mg/kg (Tediyanto, 2003). Research on the fraction of n-hexane, ethyl acetate, and water fraction P. pellucida H.B.K herb also been conducted with doses of 500 and 1000 mg / kg and the test results showed that the ethyl acetate fraction gave the strongest decrease in glucose levels compared with n-hexane fraction and water fraction (Amrullah, 2003). Has also conducted a research of active antidiabetic compounds from the ethyl acetate fraction of P. pellucida using glucose tolerance test. Active compound was characterized using the instrument to know the identity of active compounds. The results were obtained two isolates that have antidiabetic activity of isolates of PP-IIB1 and PP-IIB2 with Rf 0.35 and 0.23. The activity test results of PP-.UB1 and – PP IIB2 with each dose of 100 mg/ kg showed antidiabetic activity in alloxan-induced mice. Decrease in blood glucose levels of each isolate was 42.28% and 37.10%, PP-11131 isolates are isolates of the most well as antidiabetic, Isolate characterization of isolate PP-I1B2 with the data spectrum ultraviolet (UT'), infrared spectrum (M, the mass spectrum, 1H-70111?, and 13C-NMR, concluded that the compound isolated is oleic acid Research in the second year, is making a pharmaceutical product in tablet form from herbs sasaladaan (Peperomia pellucid) which has proven to have significant implications for antidiabetic activity through preclinical testing. Steps being taken in this research involves the extraction, the determination of water content, the orientation dose tablet, tablet formulation, evaluation of tablets and acute toxicity test to know the safety limits of extract. Extraction method used is maceration. Maceration is a cold extraction method which is the process of soaking the sample with organic solvents at room temperature in a closed container. Results maceration is from 800.05 grams of crude herb sasaladaan obtained 135.16 g thick extract. Rendement of maceration is 16.89%. Resulting extract sasaladaan is viscous, dark green with a distinctive odor, brownish and bitter taste. Determination of water content of the extract performed to determine the water content that is still contained in the extract. Water content must meet the standard for extracts for protected from microbial contamination because the water is a good medium for microbial growth. Results of water content of sasaladaan extract was 8:33%, so that the extract used in compliance with the requirements of the water content ( less than 10%) which is determined by the BPOM Orientation doses to establish dose tablet is done by testing the activity of ethanol extracts of herbs sasaladaan with glibenclamide positive control 0.45 mg/kg bw. Suspension test group given the extract with two variations of dose: 125 mg / kg and 250 mg / kg in 2% PGA orally. From the statistical analysis found that with 95% significcmce level (a = 0.05), dose test group I (125 mg / kg) had significant differences with the negative control, mean dose of 125 mg /kg proved to have an influence on degradation rate blood glucose compared with negative control mice. Tablet formulations made to obtain tablets by direct compression method, obtained four formula with variations ofAvicel ® PH102 as a tablet binder. To know the nature of the substance will be evaluated mass compressed felt. Felt mass evaluation included examination of water content, flow rate and angle of rest, and the density of powder (apparent density, solid density and compressibility). Based on the evaluation results indicate the mass flow rate of compression of each formula can flow very well because it has aflow capacity greater than 10 g / sec, so it can be said each tablet formula has a very goodflow properties. Unless the third formula hasflow capacity 8.96 g / sec which includes the powerflow is good Measurements conducted to determine the break point of adhesion or cohesion properties of particles that would affect the flow properties of the tablet mass caused by the friction between powder particles. Every formula of the tablet has a break point <25 ° which means the powder is very easy to flow, because the powder with a break angle <25 ° show a very goodflow properties. Testing real density and density incompressible used to indicate the mass compressibility of tablet compression. From the calculation of compressibility indicate the type ofmassflow felt very good #7.seen from the table felts mass index Consolidation Carrs flow properties and compressibility sufficient to meet the requirements of between 18-23%. After the tabletting process, resulting tablets conducted several evaluations in accordance with the requirements of Pharmacopoeia of Indonesia. Evaluation includes tablet weight uniformity, uniformity of size, hardness, brittleness and disintegration time. Tablet weight uniformiol has met the requirements of the Indonesian Pharmacopoeia 1979 is for a tablet that weighs an average of more than 300 mg tablet that weighs no more than five percent deviated and not a single tablet that weighs deviate more than ten percent the average tablet weight planned Weight ranges from 654.0 to 673.9 mg tablet offonnula I, formula II from 651.4 to 673.6 mg, 630.8 to 672.0 mg formula HI and formula IV from 666.0 to 680.6 mg From the results of measuring the diameter and thickness of 20 tablets for all three tablet formula shows the measurement results are almost uniform. The evaluation results for the measurement of uniformity of tablet size is 13.16 mm in diameter for formula I; 13.17 for formula II; 13.16 forformula Ill; and 13.13 for formula IV. As for the measurement of tablet thickness was 3.91 mm for formula I; 3.87 for formula II; 3.85 for formula III; and 3.89 for formula IV. The evaluation results show the value of tablet hardness as follows: formula 165.4 N, 68.17 N formula II, formula III, 72.84, 93.55 and formula IV. Where is the tablet hardness test performed to measure the compactness of the amount ofpressure resistance ofa tablet of the forces acting upon the tablet rupture. And tablets must be hard enough to withstand rupture when handling or manufacture, packaging and distribution.Friability tablets can be affected by water content of the granules and the final product. Granules are very dry and only contain very little moisture percentage, often resulting in more crisp tablets compared with granules that have a water content of 2- 4%. Friability (fragility) of tablets made in this research has met the requirements of LISP. Because, none of the tablet formulation that has an average weight loss of more than 0.8%. The evaluation results on average disintegration time of tablets produced by any formula that is eligible under 15 minutes. Tablet disintegration time is the time required for the destruction of the tablet in a timely manner so that no part is left on the screen. Performed on liquid medium with a temperature of 370 ± 20C. According to the Indonesian Pharmacopoeia, the time required for the destruction of the tablet is not coated on a suitable medium unless otherwise stated no more than 15 minutes. The results of the qualitative test of the extract and tablets showed that the compound contained in the extract was identified in the tablet formula I, formula II, formula III and formula IV. The analysis was done by Thin Layer Chromatography (7W). From the analysis shows that there is no difference between the pattern of extract spots with spotting patterns tablet formula I, II, III I and IV. In other words do not affect the formulation of the chemical components contained in the herb extracts sasaladaanAcute toxicity of ethanol extract from herbs sasaladaan (Pepemmia pellucida HBK) testing is done through observation of mortality of mice for 14 days,observation of body weight of mice for 14 days, and behavioral observations of mice for 24 hoursBased on observation data obtained to determine the price of ethanol extracts of herbs sasaladaan LD50 in mice. In testing known that the dose that causes death by 50% in male mice was 7.5 g / kg which is comparable to 5.25 g / kg rat. Based on toxicity criteria listed by Hodge and Sterner can be concluded that ethanol extract of herbs sasaladaan is practical not toxic because the LD50 between 5-15 g / kg rat.