Abstrak 
Desain, Optimasi Dan Kloning Gen Pretrombin-2 Manusia Sintetik Untuk Produksi Trombin Sebagai Komponen Lem Fibrin
Saronom Silaban, Iman Permana Maksum, Shabarni Gaffar, Sutarya Enus, Khomaini Hasan, Toto Subroto, Soetijoso Soemitro
Universitas Padjadjaran, Seminar Nasional Inovasi dan Teknologi Informasi 2014 (SNITI) Tuktuk-Samosir, 10-11 Okrober 2014
Bahasa Indonesia, Bahasa Inggris
Universitas Padjadjaran, Seminar Nasional Inovasi dan Teknologi Informasi 2014 (SNITI) Tuktuk-Samosir, 10-11 Okrober 2014
ekspresi, Escherichia coli, intein, lem fibrin, trombin
Lew fibrin adalah biomaterial perekat yang dapat diaplikasikan sebagai mengganti teknik jahitan pasca operasi. Biomaterial ini terdiri dari trombin, fibrinogen dan faktor XIII sebagai komponen utamanya. Dalam kajian ini kamii mendesain dan melakukan kloninggen prethrombin-2 (pt2) manusia sintetik sebagai prekursor trombin. Gen pt2 pada posisi C-terminal difusikan dengan suatu pengkode intein diikuti gen domain pengikat kitin, yang bermanfaat dalam proses pemurnian. Kodon pt2 dirancang sesuai dengan preferensi kodon Escherichia coli. Gen pt2 dirancang menggunakan perangkat lunak OPTIMIZER dengan penambahan sisi restriksi Ndel pada ujung 5′ dan Xhol pada ujung 3′ nya. Gen pt2 sintetik yang terdapat pada pMA-T,dipotong menggunakan enzim restriksi Ndel dam Xhol. Selanjutnya, pt2 diligasi ke vektor ekspresi pTWINI, yang telah dipotong dengan menggunakan enzim restriksi yang sama, dengan katalis T4 DNA ligase. Keberhasilan kloning pt2 ke pTWINI diverfikasi dengan sequensing DNA. Hasil sequensing menunjukkan bahwa gen pt2 basil rancangan berhasil dikloning ke dalam pTWINI. Selanjutnya, gen pt2 hasil kloning ini dapat digunakan sebagai bahan awal untuk ekspresi PT2 dalam E coli.